一、样品制备
在GenBank中搜索炭疽杆菌的大分子荚膜基因(capA)序列,将其克隆至质粒载体pUC19中,利用大肠杆菌DH5α进行复制生产,对目标质粒DNA进行提取纯化,经稀释分装得到质粒DNA样品。
二、溯源性及定值方法
本标准物质以测量值为标准值;采用采用紫外分光光度法和高分辨电感耦合等离子体质谱法(HR-ICP-MS)进行检测。通过测定核酸分子在260 nm处的吸光值可换算出质粒浓度。核酸分子中每个碱基对应一个磷原子,HR-ICP-MS方法通过定量检测标准物质中磷的含量,从而换算出标准物质的质量浓度。最终,可溯源至国际单位克(g)以及国家的法定体积计量单位升(L)。
三、特征量值及扩展不确定度
| 组分 |
标准值 |
扩展不确定度(k=2) |
基体
|
| 炭疽杆菌capA基因检测质粒DNA |
30.5ng/μL
|
9.8% |
TE缓冲液
|
标准值的扩展不确定度主要由测量方法、定值以及均匀性、稳定性等不确定度合成。
四、均匀性检验及稳定性考察
本标准物质量值自定值之日起,有效期12月,研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性,有效期内如发现量值变化,将及时通知用户。
五、包装、储存及使用
包装:本标准物质采用冻存管包装,规格100μL携带或运输时应有防碎裂保护。
储存及使用:本标准物质需置于干燥、(-18±5)℃条件下保存。本标准物质每瓶100μL,用透明塑料离心管密封包装。使用前于室温平衡30min,标准物质打开后,请尽快放回-20℃保存,使用中严格防止沾污。最小取样量1μL,使用时应按二级以上生物安全标准防护。
声明
1. 本标准物质仅供实验室研究与分析测试工作使用。因用户使用或储存不当所引起的投诉,不予承担责任。
2. 收到后请立即核对品种、数量和包装,相关赔偿只限于标准物质本身,不涉及其他任何损失。
3. 仅对加盖“北京晶品赛思科技有限公司标准物质专用章”的完整证书负责。请妥善保管此证书。
4. 如需获得更多与应用有关的信息,请与技术咨询部门联系。